<p id="zzxx5"><cite id="zzxx5"><dfn id="zzxx5"></dfn></cite></p>

        <pre id="zzxx5"></pre>

          <p id="zzxx5"></p><p id="zzxx5"></p>

              技術文章您的位置:網站首頁 >技術文章 > Azaood公司All-in-One RT SuperMix for qPCR (with dsDNase)產品介紹
              Azaood公司All-in-One RT SuperMix for qPCR (with dsDNase)產品介紹
              更新時間:2023-11-13   點擊次數:25次

              貨號:AZ00003 


              儲運條件

              -20℃

              產品組成

              產品簡介

              All-in-One RT SuperMix for qPCR(with dsDNase) 是一款便捷、減少污染的高質量一鏈cDNA 合成試劑盒,包含M-MLV GIIIReverse Transcriptase 及其反應Buffer、RNA 酶抑制劑、dNTPs,Oligo(dT)20VN 和隨機引物等一鏈cDNA 合成所需的所有組分,僅需加入RNA 模板和水即可開始反應。All-in-One RT SuperMix for qPCR(withdsDNase) 作為升后的一鏈cDNA 合成試劑盒,15 分鐘內長可獲得12 kb cDNA,產物可用于qPCR、普通PCR 等實驗。從組織或細胞中提取的RNA 往往殘留基因組DNA 污染,如果反轉錄不做去除處理,下游進行qPCR 反應時基因組DNA 與cDNA會同時進行擴增,尤其是引物設計在同一外顯子上時,影響定量準確性。本試劑盒所采用的dsDNase 能夠特異性消化雙鏈DNA 或DNARNA雜合雙鏈中的DNA,并且具有熱敏感性,在逆轉錄反應溫度下即可快速不可逆地失活。與傳統使DNase I 去除基因組DNA 污染的方法相比,dsDNase 無需額外加入EDTA 進行失活,不僅節省實驗時間,而且降低了對逆轉錄反應的抑制??梢罁蚪MDNA 污染嚴重程度,選擇去基因組DNA 污染與反轉錄分開進行,或者去基因組DNA 污染與反轉錄一步進行的操作方法。

              使用方法

              針對基因組DNA 含量低的RNA 樣品(推薦方案)

              ① 于冰上配制如下反應體系:

              a. 推薦使用試劑盒提取的高質量RNA 作為模板。

              ② 輕柔吸打混勻,瞬離;

              ③ 37℃溫育2 min,以去除基因組DNA 污染;

              ④ 55℃溫育15 min;

              ⑤ 反應結束后,85℃溫育2 min 以終止反應;

              ⑥ 迅速將獲得的cDNA 置于冰上,用于后續實驗;或立即保存于-20℃。

              針對基因組DNA 含量高RNA 樣品

              1. 基因組DNA 污染去除

              ① 于冰上配制如下反應體系:

              a. 推薦采用試劑盒提取的RNA 作為模板。

              ② 輕柔吸打混勻,瞬離;

              ③ 37℃溫育2 min,以去除基因組DNA 污染;

              注:若RNA 中基因組DNA 污染嚴重,可適當延長37℃溫育時間至5 min。

              ④ 65℃溫育2 min,使dsDNase 失活,然后置于冰上。

              2. diyi鏈cDNA 合成

              ① 于冰上配制如下反應體系:

              ② 輕柔吸打混勻,瞬離;

              ③ 50℃溫育15 min;

              注:若目標RNA 不含Poly(A) 結構,可預先25℃溫育10 min。

              ④ 反應結束后,85℃溫育2 min,以終止反應;

              ⑤ 將獲得的cDNA 溶液置于冰上,用于后續實驗。

              注:cDNA 溶液置于-20℃儲存,建議不超過1 周;置于-80℃可儲存。

              注意事項

              預混液中已經包含Oligo(dT)20VN 和隨機引物,不僅適用于包含Poly(A) 結構的真核生物mRNA,也適用于不含Poly(A) 結構的原核生物RNA、真核生物rRNA 和tRNA 等模板,但不適用于miRNA 等小RNA 模板。

              美國Azaood公司成立于2004年,是一家開發和生產用于生命科學研究、診斷和生物技術應用的高質量純化酶、蛋白質、核酸和細胞分離試劑盒、胎牛血清的行業導者;Azood公司是通過了ISO9001認證的主要制造商,可以滿足從研究到大規模批量生物加工和OEM應用與要求的公司。


              ©2023  上海創凌生物科技有限公司 All Rights Reserved.  網站地圖  滬ICP備2023009255號-1  管理登陸  技術支持:化工儀器網
              在線客服 二維碼

              掃一掃,關注我們

              尤物蜜芽国产成人精品区,免费乱理伦片在线观看夜,一本无码久本草在线中文字幕dvd,色妺妺免费AV在线

                <p id="zzxx5"><cite id="zzxx5"><dfn id="zzxx5"></dfn></cite></p>

                    <pre id="zzxx5"></pre>

                      <p id="zzxx5"></p><p id="zzxx5"></p>